DNase I

DNase I (Deoxyribonuclease I) គឺជា endodeoxyribonuclease ដែលអាចរំលាយ DNA តែមួយ ឬពីរដង។វាទទួលស្គាល់ និងបំបែកចំណង phosphodiester ដើម្បីផលិត monodeoxynucleotides ឬ oligodeoxynucleotides តែមួយ ឬពីរដងជាមួយក្រុមផូស្វាតនៅស្ថានីយ 5′ និង hydroxyl នៅស្ថានីយ 3′-។សកម្មភាពរបស់ DNase I អាស្រ័យលើ Ca2+ ហើយអាចត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មដោយអ៊ីយ៉ុងដែកដែលបែងចែកដូចជា Mn2+ និង Zn2+ ។5mM Ca2+ ការពារអង់ស៊ីមពីអ៊ីដ្រូលីស៊ីស។នៅក្នុងវត្តមានរបស់ Mg2+ អង់ស៊ីមអាចសម្គាល់ដោយចៃដន្យ និងបំបែកគេហទំព័រណាមួយនៅលើខ្សែ DNA ណាមួយ។នៅក្នុងវត្តមានរបស់ Mn2+ ខ្សែពីរនៃ DNA អាចត្រូវបានទទួលស្គាល់ និងកាត់ដំណាលគ្នានៅស្ទើរតែដូចគ្នា ដើម្បីបង្កើតជាបំណែក DNA ចុងសំប៉ែត ឬបំណែក DNA ចុងស្អិតដែលមាននុយក្លេអូទីត 1-2 លេចចេញមក។

ទ្រព្យសម្បត្តិផលិតផល

Bovine Pancreas DNase I ត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងប្រព័ន្ធបញ្ចេញផ្សិត និងបន្សុត។

Cសមាសធាតុ

ការដឹកជញ្ជូន និងការផ្ទុក

1. ស្ថេរភាពការផ្ទុក: - 15 ℃ ~ -25 ℃សម្រាប់ការផ្ទុក;

2. ស្ថេរភាពការដឹកជញ្ជូន: ការដឹកជញ្ជូននៅក្រោមកញ្ចប់ទឹកកក;

3. ផ្គត់ផ្គង់ក្នុង: 10 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl₂, 50% glycerol, pH 7.6 នៅ 25 ℃ ។

និយមន័យឯកតា

ឯកតា​មួយ​ត្រូវ​បាន​កំណត់​ថា​ជា​បរិមាណ​អង់ស៊ីម​ដែល​នឹង​បង្ខូច​កម្រិត 1 µg នៃ pBR322 DNA ទាំងស្រុង​ក្នុង​រយៈពេល 10 នាទី​នៅ​សីតុណ្ហភាព 37 អង្សារសេ។

ការត្រួតពិនិត្យគុណភាព

RNase៖5U នៃ DNase I ជាមួយនឹង 1.6 μg MS2 RNA សម្រាប់រយៈពេល 4 ម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាព 37 ℃ ផ្តល់លទ្ធផលមិនមានការរិចរិលដូចដែលបានកំណត់ដោយ agarose gel electrophoresis ។

បាក់តេរី អង់ដូតូស៊ីន៖LAL-test នេះ​បើ​យោង​តាម​ការ​បោះពុម្ព​របស់​ឱសថស្ថាន​ចិន IV 2020 វិធីសាស្ត្រ​ធ្វើតេស្ត​កម្រិត​ជែល ច្បាប់​ទូទៅ (1143)។មាតិកាអង់ដូតូស៊ីនរបស់បាក់តេរីគួរតែមាន ≤10 EU/mg។

សេចក្តីណែនាំសម្រាប់ការប្រើប្រាស់

1. រៀបចំដំណោះស្រាយប្រតិកម្មនៅក្នុងបំពង់គ្មាន RNase ស្របតាមសមាមាត្រដែលបានរាយខាងក្រោម៖

2.37 ℃ 15 នាទី;

3. បន្ថែមសតិបណ្ដោះអាសន្នការបញ្ចប់ដើម្បីបញ្ឈប់ប្រតិកម្ម និងកំដៅនៅ 65 ℃រយៈពេល 10 នាទីដើម្បីអសកម្ម DNase I. គំរូអាចត្រូវបានប្រើដោយផ្ទាល់សម្រាប់ការពិសោធន៍ប្រតិចារិកបន្ទាប់។

កំណត់ចំណាំ

1. ប្រើ 1U DNase I ក្នុងមួយμgនៃ RNA ឬ 1U DNase I សម្រាប់ RNA តិចជាង 1μg។

2.EDTA គួរតែត្រូវបានបន្ថែមទៅកំហាប់ចុងក្រោយនៃ 5 mM ដើម្បីការពារ RNA ពីការបំផ្លាញកំឡុងពេលអសកម្មអង់ស៊ីម។