Multiplex One Step RT-qPCR Premix
ការពិពណ៌នា
លេខឆ្មា៖ HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix គឺជាកញ្ចប់ PCR បរិមាណ multiplex ផ្អែកលើ RNA ជាគំរូ។នៅក្នុងការពិសោធន៍ ការចម្លងបញ្ច្រាស និង PCR បរិមាណត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងបំពង់ប្រតិកម្មដូចគ្នា ធ្វើឱ្យប្រតិបត្តិការពិសោធន៍ងាយស្រួល និងកាត់បន្ថយហានិភ័យនៃការចម្លងរោគ។ការរចនាតែមួយគត់នៃល្បាយសតិបណ្ដោះអាសន្ន និងអង់ស៊ីមអាចត្រូវបានប្រើនៅក្នុងប្រព័ន្ធ lyophilized មួយជំហាន។ឧបករណ៍ប្រើប្រាស់ Reverse Transcriptase ដែលធន់នឹងកំដៅសម្រាប់ការសំយោគប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពនៃ cDNA strand ដំបូងដោយប្រើ hotstart Taq DNA Polymerase សម្រាប់ការពង្រីកបរិមាណ។វាមានផ្ទុកនូវសតិបណ្ដោះអាសន្នប្រតិកម្មដែលប្រសើរឡើង លាយអង់ស៊ីម។ល។ និងកត្តាដែលមានប្រសិទ្ធភាពរារាំងការពង្រីក PCR ដែលមិនជាក់លាក់ និងបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃការពង្រីកនៃប្រតិកម្ម qPCR ច្រើនត្រូវបានបន្ថែម ដែលអនុញ្ញាតឱ្យពង្រីកបរិមាណហ្វ្លុយអូរីស៊ីតច្រើន ខណៈពេលដែលធានាបាននូវប្រសិទ្ធភាព amplification នៃ primers ។
សមាសធាតុ
ឈ្មោះ |
1. Lyo-Buffer |
2. ល្បាយ Lyo-Enzyme |
3. ឡេការពារ |
លក្ខខណ្ឌដឹកជញ្ជូនអ៊ីយ៉ុង
A: Lyo-buffer និងការពារ: -25 ~ -15 ℃, អាយុកាលធ្នើគឺ 1 ឆ្នាំ។
B: ល្បាយ Lyo-enzyme, 2-8 ℃, អាយុកាលធ្នើគឺ 6 ខែ។
ការណែនាំសម្រាប់ប្រតិបត្តិការ
1. ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម (យក 25μL ជាឧទាហរណ៍)
សមាសធាតុ | បរិមាណ (μL) | ការផ្តោតអារម្មណ៍ចុងក្រោយ |
លីយ៉ូ-ប៊ូហ្វឺ | 6 | 1* |
លីយ៉ូ - អង់ស៊ីមលាយ | 1 | - |
ឡេអូ - ការពារ | 8 | - |
ល្បាយ primer (10μM) | 1 | 0.1-1uM |
Probe Mix (10μM) | ០.៥ | 0.05-0.5uM |
គំរូ RNA | 5 | - |
DEPC H2O | រហូតដល់ 25 | - |
2. ពិធីការជិះកង់បានធ្វើឱ្យប្រសើរ
1) ពិធីការជិះកង់ស្តង់ដារ
ដំណាក់កាលប្រតិកម្ម | សីតុណ្ហភាព | ពេលវេលា | វដ្ត | |
1 | ប្រតិចារិកបញ្ច្រាស | 50°Ca | 10 នាទី | 1 |
2 | ការប្រែពណ៌ដើម | ៩៥ អង្សាសេ | 5 នាទី | 1 |
3 | ប្រតិកម្មពង្រីក | ៩៥ អង្សាសេ | 15 វិ | 45 វដ្ត |
60°Cb | 30 វិc |
2) ពិធីការជិះកង់លឿន
| ដំណាក់កាលប្រតិកម្ម | សីតុណ្ហភាព | ពេលវេលា | វដ្ត |
1 | ប្រតិចារិកបញ្ច្រាស | 50°Ca | 2 នាទី | 1 |
2 | ការប្រែពណ៌ដើម | ៩៥ អង្សាសេ | 2 វិ | 1 |
3 | ប្រតិកម្មពង្រីក | ៩៥ អង្សាសេ | 1 វិ |
45 វដ្ត |
60°Cb | 13 វិc |
ចំណាំ៖
a) បញ្ច្រាស ប្រតិចារិក៖ សីតុណ្ហភាពអាចជ្រើសរើស 42°C ឬ 50°C រយៈពេល 10-15 នាទី។
b) ប្រតិកម្មពង្រីក៖ សីតុណ្ហភាពត្រូវបានកែតម្រូវតាមតម្លៃ Tm នៃ primers ដែលបានរចនា។
គ)ហ្វ្លុយអូរីស សញ្ញា ការទិញយក៖ សូមកំណត់និតិវិធីពិសោធន៍ដោយយោងតាមលក្ខខណ្ឌតម្រូវរបស់សៀវភៅដៃឧបករណ៍។
ព័ត៌មានបច្ចេកទេស/ការបញ្ជាក់
ចាប់ផ្តើមក្តៅ | ការចាប់ផ្តើមក្តៅដែលភ្ជាប់មកជាមួយ |
វិធីសាស្រ្តរាវរក | ការស៊ើបអង្កេតបឋម |
វិធីសាស្ត្រ PCR | ជំហានមួយ RT-qPCR |
ប្រភេទនៃគំរូ | RNA |
កំណត់ចំណាំ
1. ផលិតផលនេះគឺសម្រាប់ប្រើប្រាស់ក្នុងការស្រាវជ្រាវតែប៉ុណ្ណោះ។
2. សូមពាក់ PPE ចាំបាច់ អាវក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ និងស្រោមដៃ ដើម្បីធានាសុខភាព និងសុវត្ថិភាពរបស់អ្នក!