មួយជំហានលឿន RT-qPCR Probe Premix-UNG
លេខឆ្មា៖ HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) គឺជាឧបករណ៍រាវរករហ័ស RT-qPCR ដែលមានមូលដ្ឋានលើការស៊ើបអង្កេត ដែលសមរម្យសម្រាប់ PCR បរិមាណតែមួយ ឬ multiplex ដោយប្រើ RNA ជាគំរូ (ដូចជាមេរោគ RNA)។ផលិតផលនេះប្រើប្រាស់ជំនាន់ថ្មីនៃ Taq DNA Polymerase ដែលបានកែប្រែអង្គបដិប្រាណ និងមួយជំហានម្តងៗ Reverse Transcriptase ជាមួយនឹងសតិបណ្ដោះអាសន្នសម្រាប់ការពង្រីកលឿន ដែលមានល្បឿនពង្រីកកាន់តែលឿន ប្រសិទ្ធភាពពង្រីក និងជាក់លាក់ខ្ពស់។វាគាំទ្រការពង្រីកដែលមានតុល្យភាពទាំងក្នុង single-plex និង multiplex នៃសំណាកកំហាប់ទាប និងខ្ពស់ក្នុងរយៈពេលដ៏ខ្លី។
សមាសធាតុ
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. អង់ស៊ីមលាយ (U+)
កំណត់ចំណាំ៖
ក.5 × RT-qPCR buffer (U+) រួមបញ្ចូល dNTP និង Mg2+;
ខ.ល្បាយអង់ស៊ីម (U+) រួមមាន ត្រានស្គ្រីបបញ្ច្រាស, ចាប់ផ្តើមក្តៅ តាក DNA ប៉ូលីមេរ៉ាស, RNase inhibitor និង UDG;
គ.ប្រើគន្លឹះ RNase-Free បំពង់ EP ជាដើម។
មុនពេលប្រើ លាយសតិបណ្ដោះអាសន្ន 5×RT-qPCR (U+) យ៉ាងហ្មត់ចត់។ប្រសិនបើមានទឹកភ្លៀងបន្ទាប់ពីរលាយ រង់ចាំឱ្យសតិបណ្ដោះអាសន្នត្រឡប់ទៅសីតុណ្ហភាពក្នុងបន្ទប់វិញ លាយ និងរលាយ បន្ទាប់មកប្រើប្រាស់ជាធម្មតា។
លក្ខខណ្ឌផ្ទុក
ផលិតផលនេះត្រូវបានដឹកជញ្ជូនដោយទឹកកកស្ងួត ហើយអាចរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព -25 ~ -15 ℃ រយៈពេល 1 ឆ្នាំ។
សេចក្តីណែនាំ
1. ប្រតិកម្ម ប្រព័ន្ធ
សមាសធាតុ | បរិមាណ (20 μL ប្រតិកម្ម) |
2 × RT-qPCR buffer | 4 μL |
អង់ស៊ីមលាយ (U+) | 0.8 μL |
Primer ទៅមុខ | 0.1 ~ 1.0μM |
Primer បញ្ច្រាស | 0.1 ~ 1.0μM |
ការស៊ើបអង្កេត TaqMan | 0.05 ~ 0.25μM |
គំរូ | X μL |
ទឹកគ្មានជាតិ RNase | រហូតដល់ 25 μL |
ចំណាំ៖ បរិមាណប្រតិកម្មគឺ 10-50μL។
2. ពិធីការជិះកង់ (Sធម្មតា)
វដ្ត ជំហាន | សីតុណ្ហភាព | ពេលវេលា | វដ្ត |
ប្រតិចារិកបញ្ច្រាស | 55 ℃ | 10 នាទី | 1 |
ការប្រែពណ៌ដើម | 95 ℃ | 30 វិ | 1 |
ការប្រែពណ៌ | 95 ℃ | 10 វិ | 45 |
ការបន្ថែម/ការបន្ថែម | 60 ℃ | 30 វិ |
ពិធីការជិះកង់ (លឿន) វដ្ត ជំហាន |
សីតុណ្ហភាព |
ពេលវេលា |
វដ្ត |
ប្រតិចារិកបញ្ច្រាស | 55 ℃ | 5 នាទី | 1 |
ការប្រែពណ៌ដើម | 95 ℃ | 5 វិ | 1 |
ការប្រែពណ៌ | 95 ℃ | 3 វិ | 43 |
ការបន្ថែម/ការបន្ថែម | 60 ℃ | 10 វិ |
កំណត់ចំណាំ៖
ក.សីតុណ្ហភាពប្រតិចារិកបញ្ច្រាសគឺចន្លោះពី 50 ℃ទៅ 60 ℃ ការបង្កើនសីតុណ្ហភាពជួយពង្រីករចនាសម្ព័ន្ធស្មុគ្រស្មាញ និងគំរូមាតិកា CG ខ្ពស់;
ខ.សីតុណ្ហភាពអព្យាក្រឹតល្អបំផុតត្រូវកែតម្រូវដោយផ្អែកលើតម្លៃ Tm នៃ primer ហើយជ្រើសរើសរយៈពេលខ្លីបំផុតសម្រាប់ការប្រមូលសញ្ញា fluorescence ដោយផ្អែកលើឧបករណ៍ PCR ពេលវេលាពិត។
កំណត់ចំណាំ
សូមពាក់ PPE ចាំបាច់ អាវក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ និងស្រោមដៃ ដើម្បីធានាសុខភាព និងសុវត្ថិភាពរបស់អ្នក!