Phosphatase អាល់កាឡាំង (ALP)
ការពិពណ៌នា
អាល់កាឡាំង Phosphatase កើតចេញពីសំពាធ E. coli ដែលផ្ទុកហ្សែន TAB5 ។អង់ស៊ីមនេះជំរុញឱ្យ dephosphorylation នៃចុង 5' និង 3' នៃ DNA និង RNA phosphomonoesters ។ដូចគ្នានេះផងដែរវា hydrolyses ribose ក៏ដូចជា deoxyribonucleoside triphosphates (NTPs និង dNTPs) ។TAB5 អាល់កាឡាំង Phosphatase ធ្វើសកម្មភាពលើផ្នែក 5' ដែលលាតសន្ធឹង 5' សម្រាក និងចុងត្រង់។Phosphatase អាចត្រូវបានប្រើនៅក្នុងកម្មវិធីជីវវិទ្យាម៉ូលេគុលជាច្រើន ដូចជាការក្លូន ឬការស៊ើបអង្កេតចុងស្លាក ដើម្បីយកចុង phosphorylated នៃ DNA ឬ RNA ចេញ។នៅក្នុងការពិសោធន៍ក្លូន ការ dephosphorylation រារាំង DNA plasmid លីនេអ៊ែរពីការចងភ្ជាប់ដោយខ្លួនឯង។វាក៏អាចបង្ខូច dNTPs ដែលមិនបានដាក់បញ្ចូលក្នុងប្រតិកម្ម PCR ដើម្បីរៀបចំគំរូសម្រាប់លំដាប់ DNA ។អង់ស៊ីមនេះត្រូវបានអសកម្មទាំងស្រុង និងមិនអាចត្រឡប់វិញបានដោយកំដៅនៅសីតុណ្ហភាព 70°C រយៈពេល 5 នាទី ដោយហេតុនេះការដក phosphatase ចេញមុនការភ្ជាប់ ឬបញ្ចប់ការដាក់ស្លាកមិនចាំបាច់។
ការប្រើប្រាស់
1.Alkaline phosphatase ភ្ជាប់ជាមួយប្រូតេអ៊ីន (អង្គបដិប្រាណ, streptavidin ។
2.Alkaline phosphatase អាចត្រូវបានប្រើដើម្បី dephosphorize 5 '-terminal នៃ DNA ឬ RNA ដើម្បីការពារការភ្ជាប់ដោយខ្លួនឯង;
3. DNA ឬ RNA ដែល dephosphorylated ខាងលើអាចត្រូវបានដាក់ស្លាកដោយ phosphates ដែលមានស្លាកវិទ្យុ (តាមរយៈ T4 poly-nucleotide kinase)
រចនាសម្ព័ន្ធគីមី
ការបញ្ជាក់
ធាតុសាកល្បង | លក្ខណៈបច្ចេកទេស |
សកម្មភាពអង់ស៊ីម | 5U/μL |
សកម្មភាព Endonuclease | រកមិនឃើញ |
សកម្មភាព Exonuuclease | រកមិនឃើញ |
សកម្មភាពដាក់លេខ | រកមិនឃើញ |
សកម្មភាព RNase | រកមិនឃើញ |
E.coli DNA | ≤1ច្បាប់ចម្លង/5U |
អង់ដូតូស៊ីន | LAL-Test, ≤10EU/mg |
ភាពបរិសុទ្ធ | ≥95% |
ការដឹកជញ្ជូននិងការផ្ទុក
ការដឹកជញ្ជូន:បរិយាកាស
ការផ្ទុក៖រក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 2-8 អង្សាសេ
ការធ្វើតេស្តឡើងវិញត្រូវបានណែនាំជីវិត៖2 ឆ្នាំ។