2 × PCR Master Mix (ដោយគ្មានថ្នាំជ្រលក់)
PCR Master Mix គឺជាប្រភេទនៃដំណោះស្រាយ PCR ធម្មតាដែលត្រៀមរួចជាស្រេចក្នុងការប្រើប្រាស់ រួមទាំង Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 និង buffer ដែលត្រូវបានកែលម្អ។កំឡុងពេលប្រតិកម្ម មានតែ primer និង template ប៉ុណ្ណោះដែលអាចត្រូវបានបន្ថែមសម្រាប់ការពង្រីក ដែលជួយសម្រួលដល់ជំហានប្រតិបត្តិការនៃការពិសោធន៍។ផលិតផលនេះមានសារធាតុរក្សាលំនឹងដ៏ល្អ ហើយអាចរក្សាទុកបានរយៈពេល 3 ខែនៅសីតុណ្ហភាព 4 ℃។ផលិតផល PCR មាន protrusion 3′-dA ហើយអាចត្រូវបានក្លូនយ៉ាងងាយស្រួលទៅជាវ៉ិចទ័រ T ។
លក្ខខណ្ឌផ្ទុក
ផលិតផលគួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅ -25 ℃ ~ -15 ℃សម្រាប់រយៈពេលពីរឆ្នាំ។
លក្ខណៈបច្ចេកទេស
| ភាពស្មោះត្រង់ (ទល់នឹងតាក) | 1 × |
| ចាប់ផ្តើមក្តៅ | No |
| លើស | ៣′-ក |
| ប៉ូលីមឺរ៉ាស | តាក DNA Polymerase |
| ទម្រង់ប្រតិកម្ម | SuperMix ឬ Master Mix |
| ល្បឿនប្រតិកម្ម | ស្តង់ដារ |
| ប្រភេទផលិតផល | PCR Master Mix (2 ×) |
សេចក្តីណែនាំ
១.ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម
| សមាសធាតុ | ទំហំ (μL) |
| គំរូ DNA | សម |
| ថ្នាំ primer 1 (10 μmol / L) | 2 |
| ថ្នាំ primer 2 (10 μmol / L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | ទៅ 50 |
2.ពិធីការពង្រីក
| ជំហាននៃវដ្ត | សីតុណ្ហភាព (°C) | ពេលវេលា | វដ្ត |
| មុន denaturation | 94 ℃ | 5 នាទី | 1 |
| ការប្រែពណ៌ | 94 ℃ | 30 វិ | 35 |
| ការស្រើបស្រាល | 50-60 ℃ | 30 វិ | |
| ផ្នែកបន្ថែម | 72 ℃ | 30-60 វិនាទី/គីឡូបៃ | |
| ផ្នែកបន្ថែមចុងក្រោយ | 72 ℃ | 10 នាទី | 1 |
កំណត់ចំណាំ៖
1) ការប្រើប្រាស់គំរូ: 50-200 ng DNA ហ្សែន;0.1-10ng DNA ប្លាស្មា។
2) មីលីក្រាម2+ការផ្តោតអារម្មណ៍៖ ផលិតផលនេះមាន 3 mM នៃ MgCl2 ដែលសមរម្យសម្រាប់ប្រតិកម្ម PCR ភាគច្រើន។
3) សីតុណ្ហភាព Annealing: សូមយោងទៅលើតម្លៃ Tm ទ្រឹស្តីនៃ Primers ។សីតុណ្ហភាព annealing អាចត្រូវបានកំណត់ទៅ 2-5 ℃ទាបជាងតម្លៃទ្រឹស្តីនៃ primer ។
4) ពេលវេលាបន្ថែម៖ សម្រាប់ការកំណត់ម៉ូលេគុល 30 វិនាទី/kb ត្រូវបានណែនាំ។សម្រាប់ការក្លូនហ្សែន 60sec/kb ត្រូវបានណែនាំ។
កំណត់ចំណាំ
១.ដើម្បីសុវត្ថិភាព និងសុខភាពរបស់អ្នក សូមពាក់អាវក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ និងស្រោមដៃដែលអាចចោលបានសម្រាប់ប្រតិបត្តិការ។
២.សម្រាប់តែការស្រាវជ្រាវប៉ុណ្ណោះ!
