Bst 2.0 DNA Polymerase (គ្មានគ្លីសេរីន ដង់ស៊ីតេខ្ពស់)
Bst DNA polymerase V2 គឺបានមកពី Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I ដែលមានសកម្មភាព 5′→3′ DNA polymerase និងសកម្មភាពជំនួសខ្សែសង្វាក់ខ្លាំង ប៉ុន្តែមិនមានសកម្មភាព 5′→3′ exonuclease ទេ។Bst DNA Polymerase V2 គឺសមស្របតាមឧត្ដមគតិសម្រាប់ការផ្លាស់ទីលំនៅ strand-displacement, isothermal amplification LAMP (loop mediated isothermal amplification) និងការបន្តបន្ទាប់គ្នាយ៉ាងឆាប់រហ័ស។Bst DNA polymerase V2 នេះមានសមត្ថភាពរារាំងសកម្មភាព DNA polymerase នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ដូច្នេះវាអាចដំណើរការបាន ហើយប្រព័ន្ធប្រតិកម្មអាចត្រូវបានបង្កើតនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ការពារការពង្រីកមិនជាក់លាក់ និងបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃប្រតិកម្ម ហើយកំណែនេះអាច ត្រូវបាន lyophilized ។លើសពីនេះទៀតវាមានសមត្ថភាពបញ្ចេញសកម្មភាពរបស់វានៅសីតុណ្ហភាពកើនឡើង ដូច្នេះការលុបបំបាត់តម្រូវការសម្រាប់ជំហានធ្វើឱ្យសកម្មដាច់ដោយឡែក។
សមាសធាតុ
សមាសភាគ | HC5007A-០១ | HC5007A-០២ | HC5007A-០៣ |
Bst DNA polymerase V2 (គ្មានគ្លីសេរីន) (32U/μL) | 0.05 មីលីលីត្រ | 0.25 មីលីលីត្រ | 2.5 មីលីលីត្រ |
10 × HC Bst V2 Buffer | 1.5 មីលីលីត្រ | 2 × 1.5 មីលីលីត្រ | 3 × 10 មីលីលីត្រ |
MgSO4 (100 មីលីម៉ែត្រ) | 1.5 មីលីលីត្រ | 2 × 1.5 មីលីលីត្រ | 2 × 10 មីលីលីត្រ |
កម្មវិធី
1.ការពង្រីក isothermal ចង្កៀង
2.DNA strand ប្រតិកម្មផ្លាស់ទីលំនៅតែមួយ
3.លំដាប់ហ្សែន GC ខ្ពស់។
4.លំដាប់ DNA នៃកម្រិតណាណូក្រាម។
លក្ខខណ្ឌផ្ទុក
ការដឹកជញ្ជូននៅក្រោម 0 ° C និងត្រូវបានរក្សាទុកនៅ -25 ° C ~ -15 ° C ។
និយមន័យឯកតា
ឯកតាមួយត្រូវបានកំណត់ថាជាបរិមាណនៃអង់ស៊ីមដែលបញ្ចូល 25 nmol នៃ dNTP ទៅក្នុងសារធាតុមិនរលាយអាស៊ីតក្នុងរយៈពេល 30 នាទីនៅសីតុណ្ហភាព 65 អង្សាសេ។
ប្រតិកម្មចង្កៀង
សមាសធាតុ | 25 μLប្រព័ន្ធ |
10 × HC Bst V2 Buffer | 2.5 μL |
MgSO4 (100 មីលីម៉ែត្រ) | 1.5 μL |
dNTPs (10mM នីមួយៗ) | 3.5 μL |
SYTO™ 16 បៃតង (25 ×)a | 1.0 μL |
ល្បាយ primerb | 6 μL |
Bst DNA Polymerase V2 (គ្មានគ្លីសេរីន) (32 U/uL) | 0.25 μL |
គំរូ | × μL |
ddH₂O | រហូតដល់ 25 μL |
កំណត់ចំណាំ៖
១) ក.SYTOTM 16 ពណ៌បៃតង (25 ×)៖ យោងតាមតម្រូវការពិសោធន៍ ថ្នាំពណ៌ផ្សេងទៀតអាចត្រូវបានប្រើជំនួស។
2) ខ.ល្បាយបឋម៖ ទទួលបានដោយការលាយ 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB និងបរិមាណផ្សេងទៀត។
ប្រតិកម្មនិងលក្ខខណ្ឌ
1 × HC Bst V2 Buffer សីតុណ្ហភាព incubation ស្ថិតនៅចន្លោះ 60°C និង 65°C។
ភាពអសកម្មនៃកំដៅ
80 ° C, 20 នាទី។