RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A

លេខឆ្មា៖ HCB5204A

កញ្ចប់: 96RXN / 960RXN / 9600RXN

ការពិពណ៌នាពីផលិតផល

ព័ត៌មានលម្អិតអំពីផលិតផល

ផលិតផលនេះមានផ្ទុកនូវប្រតិកម្ម RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase និង reverse transcriptase ដែលធន់នឹងកំដៅ) សារធាតុការពារ lyophilized និងសមាសធាតុជ្រលក់ពណ៌ chromogenic ។ដើម្បីប្រើ គ្រាន់តែប្រើ Buffer អង់ស៊ីមប្រតិកម្ម និង primer ត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នា និងបន្ថែមទៅក្នុងគំរូ។ការបន្ថែមសារធាតុការពារ lyophilized អាចត្រង់។វាត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹង lyophilizer និង lyophilized ហើយមានតែ primers និង templates ប៉ុណ្ណោះដែលត្រូវបានបន្ថែមនៅពេលប្រើ។ឧបករណ៍នេះផ្តល់នូវការរកឃើញយ៉ាងរហ័ស និងច្បាស់លាស់នៃការពង្រីក ដែលប្រតិកម្មអវិជ្ជមានត្រូវបានបង្ហាញជាពណ៌ក្រហម ហើយប្រតិកម្មវិជ្ជមានត្រូវបានបង្ហាញដោយការផ្លាស់ប្តូរទៅជាពណ៌លឿង។

មុន៖ L-Glycerol-3-phosphate Oxidase

បន្ទាប់៖ T4 RNA ligase

សមាសភាគ

សមាសភាគ	HCB5204A-01	HCB5204A-02	HCB5204A-03
Loop-mediated Amplification Buffer (ជាមួយថ្នាំជ្រលក់)	0.96 មីលីលីត្រ	4.80 មីលីលីត្រ × 2	9.60ml × 10
RT-អង់ស៊ីមលាយ	270 μL	2.70 មីលីលីត្រ	2.70ml × 10
ថ្នាំការពារ Lyophilized	0.96 មល×2	9.60 មីលីលីត្រ × 2	9.60ml × 20

កម្មវិធី

សម្រាប់ DNA ឬ RNA isothermal amplification ។

លក្ខខណ្ឌផ្ទុក

ដឹកជញ្ជូនជាមួយទឹកកកស្ងួត រក្សាទុកនៅ -25 ~ -15 ℃។ជៀសវាងការកកញឹកញាប់ ផលិតផលមានសុពលភាព 12 ខែ។

ពិធីការ

1.រលាយសតិបណ្ដោះអាសន្នប្រតិកម្មដែលត្រូវប្រើនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។Vortex ដោយសង្ខេប ឬដាក់បញ្ច្រាសបំពង់ជាច្រើនដងដើម្បីលាយបញ្ចូលគ្នាយ៉ាងហ្មត់ចត់ បន្ទាប់មក centrifuge ដើម្បីប្រមូលរាវទៅបាតបំពង់។

2.ការរៀបចំប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម។សារធាតុប្រតិកម្មនេះអាចត្រូវបានរៀបចំនៅក្នុងប្រព័ន្ធប្រតិកម្មពីរ ល្បាយប្រតិកម្មរាវ និងល្បាយប្រព័ន្ធ lyophilized ។

1) រៀបចំល្បាយប្រតិកម្មរាវ

សមាសភាគ	កម្រិតសំឡេង
Loop-mediated Amplification Buffer (ជាមួយថ្នាំជ្រលក់)	10 μL
RT-អង់ស៊ីមលាយ	2.8 μL
10 × Primer លាយ^a	5 μL
គំរូ DNA/RNA^b	× μL
ទឹកគ្មានជាតិនុយក្លេអ៊ែរ	រហូតដល់ 50 μL

2) លាយប្រព័ន្ធ Lyophilization

① រៀបចំល្បាយ lyophilized

សមាសភាគ	កម្រិតសំឡេង
Loop-mediated Amplification Buffer (ជាមួយថ្នាំជ្រលក់)	10 μL
ថ្នាំការពារ Lyophilized	20 μL
RT-អង់ស៊ីមលាយ	2.8 μL
ទឹកគ្មានជាតិនុយក្លេអ៊ែរ	រហូតដល់ 50 μL

② Lyophilization៖ ល្បាយដែលបានរៀបចំត្រូវបាន lyophilized នៅក្នុងប្រព័ន្ធ 50μL

③ រៀបចំល្បាយប្រតិកម្ម

សមាសភាគ	កម្រិតសំឡេង
ល្បាយ Lyophilized	1 ដុំ
10 × Primer លាយ^a	5 μL
គំរូ DNA/RNA^b	× μL
ទឹកគ្មានជាតិនុយក្លេអ៊ែរ	រហូតដល់ 50 μL

កំណត់ចំណាំ៖

១) ក.10 × Primer Mix : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM រង្វិលជុំ F/B;

2) ខ.DEPC (រលាយក្នុងទឹក) ត្រូវបានណែនាំសម្រាប់ templ អាស៊ីត nucleic ។

1.ភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 65°C រយៈពេល 30-45 នាទី ដែលអាចពង្រីកបានសមស្របទៅតាមពេលវេលានៃប្រតិកម្ម។

2.យោងតាមភ្នែកទទេ ពណ៌លឿងគឺវិជ្ជមាន ហើយពណ៌ក្រហមគឺអវិជ្ជមាន។

កំណត់ចំណាំ

1.អំបិលអាចលេចឡើងនៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់សតិបណ្ដោះអាសន្ន vortex ខ្លីៗ ឬបំពង់ដាក់បញ្ច្រាសជាច្រើនដង ដើម្បីលាយយ៉ាងហ្មត់ចត់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។

2.សីតុណ្ហភាពប្រតិកម្មអាចត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើររវាង 62 ℃ និង 68 ℃ យោងទៅតាមលក្ខខណ្ឌនៃ primers ។

3.សារធាតុវេចខ្ចប់មិនគួរត្រូវបានប៉ះពាល់នឹងខ្យល់ក្នុងរយៈពេលយូរទេ។

4.ប្រតិកម្មប្រែពណ៌ក្រហម និងលឿងអាស្រ័យលើការផ្លាស់ប្តូរ pH របស់ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម សូមកុំប្រើដំណោះស្រាយផ្ទុកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក Tris ដែលបានណែនាំឱ្យប្រើ ddH₂O អាស៊ីត nucleic រក្សាទុក;

5.ការពិសោធន៍គួរតែមានលក្ខណៈស្តង់ដារ រួមទាំងការរៀបចំប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម lyophilization និងដំណើរការគំរូ និងដំណើរការបន្ថែមគំរូ។

6.ដើម្បីជៀសវាងការចម្លងរោគ វាត្រូវបានណែនាំអោយរៀបចំប្រព័ន្ធប្រតិកម្មនៅក្នុងកៅអីដែលស្អាតខ្លាំងបំផុត ហើយនៅក្នុងប្រអប់ផ្សេងទៀត បន្ថែមគំរូទៅបំពង់ផ្សែងនៃបន្ទប់ ដើម្បីជៀសវាងការជ្រៀតជ្រែកវិជ្ជមានមិនពិត។