2 × PCR Super Mix (ជាមួយថ្នាំជ្រលក់)
2 × PCR Master Mix មាន Taq DNA Polymerase, dNTPs និងសមាសធាតុ PCR ផ្សេងទៀតដែលត្រូវការ។Master Mix មានស្ថេរភាពរយៈពេល 3 ខែនៅសីតុណ្ហភាព 4 ℃ ជាមួយនឹងស្ថេរភាពតាមតម្រូវការរបស់យើង។ដំណោះស្រាយមុនលាយត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរសម្រាប់ PCR ធម្មតា និងរួចរាល់ក្នុងការប្រើប្រាស់ដោយបន្ថែមគំរូ DNA និង primers ។ផលិតផល PCR អាចត្រូវបានផ្ទុកដោយផ្ទាល់សម្រាប់ electrophoresis ជាមួយនឹងថ្នាំជ្រលក់ពណ៌ខៀវ bromophenol ដែលបានផ្ទុកជាមុន។ផលិតផលពង្រីកមាន 3 '-dA protrusion ហើយអាចត្រូវបានក្លូនយ៉ាងងាយស្រួលទៅជាវ៉ិចទ័រ T ។2×PCR Master Mix សម្រួលដំណើរការ PCR និងកាត់បន្ថយការចម្លងរោគ។
លក្ខខណ្ឌផ្ទុក
ផលិតផលគួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅ -25 ℃ ~ -15 ℃សម្រាប់រយៈពេល 2 ឆ្នាំ។
លក្ខណៈបច្ចេកទេស
ភាពស្មោះត្រង់(ទល់នឹងតាក) | 1 × |
ចាប់ផ្តើមក្តៅ | No |
លើស | ៣'-ក |
ប៉ូលីមឺរ៉ាស | តាក DNA Polymerase |
ទម្រង់ប្រតិកម្ម | SuperMix ឬ Master Mix |
ល្បឿនប្រតិកម្ម | ស្តង់ដារ |
ប្រភេទផលិតផល | PCR Master Mix (2x) |
សេចក្តីណែនាំ
១.ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម
សមាសធាតុ | កម្រិតសំឡេង(μL) |
គំរូ DNA | សម |
ថ្នាំ primer 1 (10 μmol / L) | 2 |
ថ្នាំ primer 2 (10 μmol / L) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | ទៅ 50 |
2.ពិធីការពង្រីក
ជំហាននៃវដ្ត | សីតុណ្ហភាព (°C) | ពេលវេលា | វដ្ត |
ការប្រែពណ៌ដើម | 94 | 5 នាទី | 1 |
ការប្រែពណ៌ | 94 | 30 វិ | 35 |
ការស្រើបស្រាល | 50-60 | 30 វិ | |
ផ្នែកបន្ថែម | 72 | 30-60 វិនាទី/គីឡូបៃ | |
ផ្នែកបន្ថែមចុងក្រោយ | 72 | 10 នាទី | 1 |
ចំណាំ៖
1) ការប្រើប្រាស់គំរូ: 50-200ng DNA ហ្សែន;0.1-10ng plasmid DNA ។
2) មីលីក្រាម2+ការផ្តោតអារម្មណ៍៖ ផលិតផលនេះមាន 3mM នៃ MgCl2 ដែលសមរម្យសម្រាប់ប្រតិកម្ម PCR ភាគច្រើន។
3) សីតុណ្ហភាព Annealing: សូមយោងទៅលើតម្លៃ Tm ទ្រឹស្តីនៃ primers ។សីតុណ្ហភាព annealing អាចត្រូវបានកំណត់ទៅ 2-5 ℃ទាបជាងតម្លៃទ្រឹស្តីនៃ primer ។
4) ពេលវេលាបន្ថែម៖ សម្រាប់ការកំណត់ម៉ូលេគុល 30 វិនាទី/kb ត្រូវបានណែនាំ។សម្រាប់ការក្លូនហ្សែន 60 វិនាទី/kb ត្រូវបានណែនាំ។
កំណត់ចំណាំ
១.ផលិតផល PCR ដែលមាន 2 × PCR Master Mix មិនស័ក្តិសមសម្រាប់ electrophoresis ជែល polyacrylamide ទេ។
២.ដើម្បីសុវត្ថិភាព និងសុខភាពរបស់អ្នក សូមពាក់អាវក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ និងស្រោមដៃដែលអាចចោលបានសម្រាប់ប្រតិបត្តិការ។
៣.វាត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវប្រើតែប៉ុណ្ណោះ!