ក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូន Poly A RNA
លេខឆ្មា៖ HC4001A
Poly A, polyadenylate គឺជាល្បាយនៃ 100 ~ 10000 polyadenylates ដែលត្រូវបាន polymerized ដោយ polynucleotide phosphorylase in vitro ។នៅក្នុង vivo, poly (a) ត្រូវបានបន្ថែមទៅស្ថានីយ 3 នៃ mRNA ដោយអង់ស៊ីម ដើម្បីបង្កើនស្ថេរភាពនៃ mRNA ។នៅក្នុងការអនុវត្តនៃការទាញយកអាស៊ីត nucleic ការបន្ថែម poly A ទៅក្នុងដំណោះស្រាយ lysate ឬចងអាចធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវទិន្នផលនៃ DNA និង RNA ។យន្តការនៃ poly A ធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវទិន្នផលនៃអាស៊ីត nucleic មានដូចខាងក្រោម:
1. ទំនាក់ទំនងឆ្អែតជាមួយនឹងការ adsorption ផ្ទៃនៃអត្ថបទ។អត្ថបទ polypropylene ភាគច្រើនមានអគ្គិសនីឋិតិវន្តនៅលើផ្ទៃដែលនឹងស្រូបយកអាស៊ីត nucleic ។ក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូន RNA អាចឆ្អែតទាំងនេះឥទ្ធិពល adsorption និងកាត់បន្ថយការបាត់បង់អាស៊ីត nucleic គោលដៅ។
2. អសកម្ម នុយក្លេអ៊ែរ ដាន៖ មាន នុយក្លេអ៊ែ ផ្សេងៗ នៅក្នុងគំរូជីវសាស្រ្ត និងបរិស្ថាន។សារធាតុ Poly A អាចអសកម្ម នុយក្លេអ៊ែរ ដាននៅក្នុងការស្រង់ចេញ ឬការអភិរក្សជំហានទៅធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវទិន្នផល និងស្ថេរភាពនៃអាស៊ីត nucleic គោលដៅ។
3. Coprecipitation: នៅក្នុងជំហានបន្សុតអាស៊ីត nucleic នៃទឹកភ្លៀងដែលបានសម្របសម្រួល ឬចងភ្ជាប់ poly A អាច coprecipitate ជាមួយអាស៊ីត nucleic គោលដៅ ឬបង្កើតជាភាគល្អិតវត្ថុធាតុ polymer ទៅធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវការងើបឡើងវិញ។
លក្ខខណ្ឌផ្ទុក
-20 ~ 8 ℃, ការផ្ទុកស្ងួត, ការផ្ទុករយៈពេលវែងគួរតែត្រូវបានដាក់នៅ -20 ℃
ការបញ្ជាក់
លេខ CAS | 26763-19-9 |
រូបរាង | ម្សៅ lyophilized ពណ៌ស |
ភាពបរិសុទ្ធ | 99% |
ទម្ងន់ម៉ូលេគុល | 700-3500 KDa |
វិធីសាស្រ្តប្រើប្រាស់
យកបរិមាណសមស្របនៃម្សៅ lyophilized បន្ថែមទឹកដែលបានព្យាបាល DEPC ឬដំណោះស្រាយអំបិល Guanidine ទៅរំលាយវាទៅក្នុង 0.1-1ug/uL ហើយបន្ទាប់មកខ្ចប់វា ហើយទុកវានៅ -20°C។
កម្មវិធី
1. ការទាញយក DNA/RNA មេរោគ៖ ការបន្ថែម 1-5ug Carrier RNA ទៅ lysate អាចធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវទិន្នផលនៃ RNA/DNA ធ្វើឱ្យមានស្ថេរភាពនៃអាស៊ីត nucleic គោលដៅ និងជៀសវាងការរិចរិលនៃអាស៊ីត nucleic ដែលបន្សុតកំឡុងពេលផ្ទុក។
2. នៅក្នុងការស្រង់ចេញ micro DNA/RNA ដោយវិធីសាស្ត្រភ្នាសជួរឈរ (<1ug) ការបន្ថែម RNA របស់នាវាទៅ 1-5ug គឺអំណោយផលក្នុងការកែលម្អទិន្នផលអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក។
3. នៅក្នុងជំហាននៃទឹកភ្លៀង និងកំហាប់អាស៊ីត nucleic ដែលបានសម្របសម្រួលជាតិអាល់កុល ការបន្ថែម RNA នៃក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូន 1-2ug គឺមានប្រយោជន៍ក្នុងការកែលម្អការស្ដារឡើងវិញនៃផ្នែកខ្លី RNA ។
4. នៅក្នុងដំណោះស្រាយប្រតិកម្ម PCR ស៊ើបអង្កេតបរិមាណ ការបន្ថែម RNA នៃក្រុមហ៊ុនបញ្ជូន 10-100ng ទៅក្នុងដំណោះស្រាយប្រតិកម្មគឺមានប្រយោជន៍ក្នុងការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវភាពប្រែប្រួល និងកាត់បន្ថយ CTតម្លៃ។