Superstart qPCR Premix plus-UNG

លេខឆ្មា៖ HCB5071E

កញ្ចប់: 100RXN / 1000RXN / 10000RXN

លីអូហ្វីលីស

ការកែប្រែអង្គបដិប្រាណ 95 ℃ ការចាប់ផ្តើមក្តៅ 1-5 នាទី។

ភាពប្រែប្រួលនិងភាពជាក់លាក់ខ្ពស់។

ការរកឃើញមានស្ថេរភាពនៅកំហាប់ទាប តម្លៃ fluorescence ខ្ពស់។

ផ្ញើការសាកសួរ

ការពិពណ៌នាពីផលិតផល

ព័ត៌មានលម្អិតអំពីផលិតផល

លេខឆ្មា៖ HCB5071E

Superstart qPCR Premix plus-UNG គឺជាសារធាតុពិសេសដែលរចនាឡើងសម្រាប់ប្រតិកម្មគុណភាព និងបរិមាណនៃ PCR ពេលវេលាពិតប្រាកដ ដោយប្រើការរកឃើញដោយផ្អែកលើការស៊ើបអង្កេត ដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងជាពិសេសសម្រាប់ដំណើរការ lyophilization ។វាមានអង់ស៊ីមចាប់ផ្តើមក្តៅប្រលោមលោក Hotstart Taq plus (DG) ដែលមានសកម្មភាពអង់ស៊ីម Taq របស់វាបិទជិតនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ទប់ស្កាត់ការពង្រីកមិនជាក់លាក់ដែលបណ្តាលមកពី primer non-specific annealing ឬ primer dimer formation នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌសីតុណ្ហភាពទាប ដូច្នេះវាធ្វើអោយប្រសើរឡើង។ ភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្មពង្រីក។សារធាតុប្រតិកម្មនេះប្រើសតិបណ្ដោះអាសន្ន qPCR ជាក់លាក់មួយដែលត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរ និងប្រព័ន្ធប្រឆាំងការចម្លងរោគ UNG/dUTP ដើម្បីសម្រេចបាននូវការចាប់ផ្តើមក្តៅយ៉ាងឆាប់រហ័ស ធ្វើអោយប្រសើរឡើងយ៉ាងខ្លាំងនូវប្រសិទ្ធភាព និងភាពប្រែប្រួលនៃប្រតិកម្ម qPCR ។វាអាចទទួលបានខ្សែកោងស្ដង់ដារល្អនៅក្នុងជួរបរិមាណដ៏ធំទូលាយ និងអនុវត្តបរិមាណឱ្យបានត្រឹមត្រូវ ការពារការពង្រីកវិជ្ជមានមិនពិតដែលបង្កឡើងដោយផលិតផល PCR សំណល់ ឬការចម្លងរោគ aerosol ។សារធាតុប្រតិកម្មនេះគឺត្រូវគ្នាជាមួយឧបករណ៍ PCR បរិមាណ fluorescent ភាគច្រើនពីក្រុមហ៊ុនផលិតដូចជា Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad និង Roche ជាដើម ហើយបង្ហាញនូវស្ថេរភាពល្អក្នុងទម្រង់ lyophilized ។

មុន៖ BsaI HCP1014A

បន្ទាប់៖ ប្រូតេអ៊ីន K (រាវ) HC4502A

សមាសភាពនៃសារធាតុប្រតិកម្ម

1. 5 × HotstartPremix plus-UNG (Mg²⁺ឥតគិតថ្លៃ) (DG)

2. 250 mM MgCl₂

3. 4×lyoprotectant (ស្រេចចិត្ត)

លក្ខខណ្ឌផ្ទុក

ការផ្ទុករយៈពេលវែងនៅ -20 ℃;អាចរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4 ℃បានរហូតដល់ទៅ 3 ខែ។លាយល្អមុនពេលប្រើនិងជៀសវាងការត្រជាក់ និងរលាយម្តងហើយម្តងទៀត។

ពិធីការជិះកង់

នីតិវិធី	សីតុណ្ហភាព	ពេលវេលា	វដ្ត
ការរំលាយអាហារ	50 ℃	2 នាទី	1
ការធ្វើឱ្យសកម្មប៉ូលីមែរ	៩៥ អង្សាសេ	1~5 នាទី	1
និស្ស័យ	៩៥ អង្សាសេ	10 ~ 20 វិ	៤០-៥០
ការបន្ថែមនិងការបន្ថែម	56 ~ 64 ℃	20 ~ 60 វិ	៤០-៥០

qPCR ប្រតិកម្មរាវ Syការរៀបចំដើម

ការតែងនិពន្ធ	បរិមាណ 25µL	បរិមាណ 50µL	ការផ្តោតអារម្មណ៍ចុងក្រោយ
5 × HotstartPremix បូក-UNG(ម²⁺ឥតគិតថ្លៃ) (DG)	5µL	10µL	1 ×
250 មីលីម៉ែត្រ MgCl₂	0.45µL	0.9µL	៤.៥ ម។
4 × ឡេអូការពារ¹	6.25µL	12.5µL	1 ×
25 × Primer-Probe Mix²	1µL	2µL	1 ×
គំរូ DNA³	——	——	——
ddH₂O	ទៅ 25µL	ទៅ 50µL	——

1. ការប្រមូលផ្តុំចុងក្រោយនៃ 0.2μM សម្រាប់ primers ជាធម្មតាផ្តល់លទ្ធផលល្អ;នៅពេលដែលដំណើរការប្រតិកម្មមិនល្អ លៃតម្រូវកំហាប់ primer ក្នុងចន្លោះ 0.2-1μM តាមតម្រូវការ។ការផ្តោតអារម្មណ៍ស៊ើបអង្កេតជាធម្មតាត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរក្នុងចន្លោះ 0.1-0.3μM តាមរយៈការពិសោធន៍ជម្រាល ដើម្បីស្វែងរកបន្សំដ៏ល្អប្រសើរ។

2. ចំនួនចម្លងនៃហ្សែនគោលដៅដែលមាននៅក្នុងប្រភេទផ្សេងៗនៃគំរូប្រែប្រួល។បើចាំបាច់ ការបន្ថយជម្រាលអាចត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីកំណត់បរិមាណបន្ថែមគំរូល្អបំផុត។

3. ប្រព័ន្ធនេះអាចត្រូវបាន lyophilized;នៅពេលដែលអតិថិជនប្រើប្រព័ន្ធនេះដោយគ្មានលក្ខខណ្ឌតម្រូវឱ្យត្រជាក់ - សម្ងួត 4 × lyoprotectant អាចត្រូវបានជ្រើសរើសដោយជ្រើសរើស; ប្រសិនបើមានតម្រូវការផលិតផលស្ងួត - ត្រជាក់ក្នុងអំឡុងពេល reagents ដំណើរការផលិតផលមានសុពលភាពវាត្រូវតែបន្ថែម 4 × lyoprotectant ដើម្បីធានាបាននូវភាពស៊ីសង្វាក់គ្នាជាមួយនឹងសមាសធាតុនៃប្រព័ន្ធ lyophilized ។ និងផលប៉ះពាល់។

នៅពេលដែលប្រព័ន្ធត្រូវបានប្រើប្រាស់d សម្រាប់ស្ងួតត្រជាក់ រៀបចំ ប្រព័ន្ធ as ខាងក្រោម៖

ការតែងនិពន្ធ	25µL ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម
5 × HotstartPremix plus-UNG (Mg²⁺ឥតគិតថ្លៃ) (DG)	5µL
250 មីលីម៉ែត្រ MgCl₂	0.45µL
4 × ឡេអូការពារ	6.25µL
25 × Primer-Probe Mix	1µL
ddH₂O	ទៅ 18 ~ 20µL

* ប្រសិនបើប្រព័ន្ធផ្សេងទៀតសម្រាប់ការស្ងួតត្រជាក់គឺចាំបាច់ សូមពិគ្រោះដោយឡែកពីគ្នា។

ដំណើរការ Lyophilizationss

នីតិវិធី	សីតុណ្ហភាព	ពេលវេលា	លក្ខខណ្ឌ	សម្ពាធ
ការបង្កកជាមុន	4 ℃	30 នាទី	កាន់	1 atm
	-50 ℃	60 នាទី	ត្រជាក់
	-50 ℃	180 នាទី	កាន់
ការសម្ងួតបឋម	-៣០ អង្សាសេ	60 នាទី	កំដៅ	ម៉ាស៊ីនបូមធូលីចុងក្រោយ
ការសម្ងួតបឋម	-៣០ អង្សាសេ	70 នាទី	កាន់	ម៉ាស៊ីនបូមធូលីចុងក្រោយ
ការសម្ងួតបន្ទាប់បន្សំ	២៥ អង្សាសេ	60 នាទី	កំដៅ	ម៉ាស៊ីនបូមធូលីចុងក្រោយ
ការសម្ងួតបន្ទាប់បន្សំ	២៥ អង្សាសេ	300 នាទី	កាន់	ម៉ាស៊ីនបូមធូលីចុងក្រោយ

1. ដំណើរការ lyophilization នេះ គឺជាដំណើរការស្ងួតនៅនឹងកន្លែងសម្រាប់ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម 25µL ។ប្រសិនបើការសម្ងួតអង្កាំត្រជាក់ ឬដំណើរការស្ងួតក្នុងកន្លែងផ្សេងទៀតគឺត្រូវបានទាមទារ សូមសាកសួរដោយឡែកពីគ្នា។

2. ដំណើរការ lyophilization ខាងលើគឺសម្រាប់ជាឯកសារយោងតែប៉ុណ្ណោះ។ប្រភេទផលិតផលផ្សេងៗគ្នា និងម៉ាស៊ីនសម្ងួតត្រជាក់ខុសៗគ្នាមានប៉ារ៉ាម៉ែត្រខុសៗគ្នា ដូច្នេះការកែតម្រូវអាចត្រូវបានធ្វើឡើងតាមការពិតលក្ខខណ្ឌកំឡុងពេលប្រើប្រាស់។

3. ដំណើរការ lyophilization ផ្សេងគ្នាអាចមានលក្ខណៈសមរម្យសម្រាប់ទំហំបាច់ផ្សេងគ្នានៃ lyophilizedផលិតផល ដូច្នេះការធ្វើតេស្តមានសុពលភាពគ្រប់គ្រាន់ត្រូវតែអនុវត្តនៅពេលប្រើសម្រាប់ផលិតកម្មទ្រង់ទ្រាយធំ។

ការណែនាំសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ lyophilizeឃ ម្សៅ

1. ច្របាច់ម្សៅ lyophilized ដោយសង្ខេប;

2. បន្ថែមគំរូអាស៊ីត nucleic ទៅម្សៅ lyophilized និងបន្ថែមទឹករហូតដល់ 25µL;

3. លាយល្អដោយ centrifugation ហើយដំណើរការលើម៉ាស៊ីន។

ការត្រួតពិនិត្យគុណភាព៖

1. ការធ្វើតេស្តមុខងារ៖ ភាពប្រែប្រួល ភាពជាក់លាក់ លទ្ធភាពផលិតឡើងវិញនៃ qPCR ។

2. គ្មានសកម្មភាពនុយក្លេអ៊ែរ exogenous គ្មានការចម្លងរោគ endo/exonuclease ។

ព័ត៌មានបច្ចេកទេស:

1. Superstart qPCR Premix plus-UNG ប្រើអង់ស៊ីម hot-start ប្រលោមលោកដែលអនុញ្ញាតឱ្យចាប់ផ្តើមក្តៅយ៉ាងឆាប់រហ័សក្នុងរយៈពេល 1~5 នាទី;តាមរយៈការបង្កើតសតិបណ្ដោះអាសន្នពិសេស វាសាកសមសម្រាប់ប្រតិកម្ម PCR បរិមាណ multiplex fluorescent ។

2. វាមានភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ដែលធ្វើអោយប្រសើរឡើងយ៉ាងខ្លាំងនូវភាពប្រែប្រួលនៃការរកឃើញដែនកំណត់ PCR បរិមាណ fluorescence ធ្វើឱ្យខ្សែកោង amplification មានលក្ខណៈធម្មតា តម្លៃ fluorescence ទទួលបានការកែលម្អជាក់ស្តែងនៅគំរូកំហាប់ទាប សមរម្យជាសារធាតុរាវរក PCR បរិមាណដែលមានភាពប្រែប្រួលខ្ពស់។

3. សម្រាប់ primers ដែលមានសីតុណ្ហភាព annealing ទាបជាង ឬយូរជាង 200bp បំណែក វិធីសាស្ត្រ 3 ជំហានត្រូវបានណែនាំ។

4. ប្រសិទ្ធភាពនៃការប្រើប្រាស់ dUTP និងភាពរសើបចំពោះអង់ស៊ីម UNG ខុសគ្នាសម្រាប់ហ្សែនគោលដៅផ្សេងៗគ្នា ដូច្នេះប្រសិនបើការប្រើប្រាស់ប្រព័ន្ធ UNG នាំឱ្យថយចុះនូវភាពរសើបនៃការរកឃើញ ប្រព័ន្ធប្រតិកម្មគួរតែត្រូវបានកែតម្រូវ និងធ្វើឱ្យប្រសើរ។ប្រសិនបើត្រូវការជំនួយផ្នែកបច្ចេកទេស សូមទាក់ទងក្រុមហ៊ុនរបស់យើង។

5. ប្រើតំបន់ពិសេស និងបំពង់បង្ហូរមុន និងក្រោយពេលពង្រីក ពាក់ស្រោមដៃកំឡុងពេលប្រតិបត្តិការ ហើយជំនួសវាឱ្យបានញឹកញាប់។កុំបើកបំពង់ប្រតិកម្មបន្ទាប់ពីការបញ្ចប់ PCR ដើម្បីកាត់បន្ថយការចម្លងរោគនៃគំរូដោយផលិតផល PCR ។