Universal SYBR GREEN qPCR Premix (ខៀវ)

លេខឆ្មា៖ HCB5041B

Universal Blue qPCR Master Mix (Dye Based) គឺជាដំណោះស្រាយមុនសម្រាប់ការពង្រីក PCR បរិមាណ 2 × ពេលវេលាជាក់ស្តែង ដែលកំណត់លក្ខណៈដោយភាពប្រែប្រួល និងភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ មានពណ៌ខៀវ និងមានឥទ្ធិពលនៃការតាមដានការបន្ថែមគំរូ។សមាសធាតុស្នូល Taq DNA polymerase ប្រើការចាប់ផ្តើមក្តៅរបស់អង្គបដិប្រាណ ដើម្បីទប់ស្កាត់ការពង្រីកមិនជាក់លាក់ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព ដោយសារតែការ annealing primer កំឡុងពេលរៀបចំគំរូ។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ រូបមន្តបន្ថែមកត្តាជំរុញដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពពង្រីកនៃប្រតិកម្ម PCR និងធ្វើឱ្យស្មើគ្នានូវការពង្រីកហ្សែនជាមួយនឹងមាតិកា GC ផ្សេងៗគ្នា (30 ~ 70%) ដូច្នេះ PCR បរិមាណអាចទទួលបានទំនាក់ទំនងលីនេអ៊ែរល្អក្នុងបរិមាណធំទូលាយ។ តំបន់។ផលិតផលនេះមានសារធាតុពិសេស ROX Passive Reference Dye ដែលអាចអនុវត្តបានចំពោះឧបករណ៍ qPCR ភាគច្រើន។វាមិនចាំបាច់ក្នុងការកែតម្រូវកំហាប់ ROX លើឧបករណ៍ផ្សេងៗនោះទេ។វាគ្រាន់តែជាការចាំបាច់ដើម្បីបន្ថែម primers និងគំរូដើម្បីរៀបចំប្រព័ន្ធប្រតិកម្មសម្រាប់ការពង្រីក។

សមាសធាតុ

Universal Blue qPCR Master Mix

លក្ខខណ្ឌផ្ទុក

ផលិតផលនេះត្រូវបានដឹកជញ្ជូនជាមួយកញ្ចប់ទឹកកក ហើយអាចរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព -25 ℃ ~ - 15 ℃ សម្រាប់រយៈពេល 18 ខែ។វាចាំបាច់ក្នុងការជៀសវាងការ irradiation ពន្លឺខ្លាំងនៅពេលរក្សាទុកឬរៀបចំប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម។

ការបញ្ជាក់

សេចក្តីណែនាំ

1. ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម

[ចំណាំ]៖ លាយយ៉ាងហ្មត់ចត់មុនពេលប្រើ ដើម្បីជៀសវាងពពុះច្រើនពីការញ័រខ្លាំង។

ក) កំហាប់បឋម៖ កំហាប់បឋមចុងក្រោយគឺ 0.2μmol/L ហើយក៏អាចកែតម្រូវបានរវាង 0.1 និង 1.0μmol/L តាមភាពសមស្រប។

ខ) ការប្រមូលផ្តុំគំរូ៖ ប្រសិនបើគំរូគឺជាដំណោះស្រាយស្តុក cDNA ដែលមិនរលាយ នោះបរិមាណដែលបានប្រើមិនគួរលើសពី 1/10 នៃបរិមាណសរុបនៃប្រតិកម្ម qPCR ទេ។

គ) ការរំលាយគំរូ៖ វាត្រូវបានណែនាំឱ្យពនលាយដំណោះស្រាយស្តុក cDNA ដោយ 5-10 ដង។ចំនួនដ៏ល្អប្រសើរនៃគំរូដែលបានបន្ថែមគឺប្រសើរជាងនៅពេលដែលតម្លៃ Ct ដែលទទួលបានដោយការពង្រីកគឺ 20-30 វដ្ត។

ឃ) ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម៖ វាត្រូវបានណែនាំឱ្យប្រើ 20μL ឬ 50μL ដើម្បីធានាបាននូវប្រសិទ្ធភាព និងលទ្ធភាពនៃការពង្រីកហ្សែនគោលដៅ។

ង) ការរៀបចំប្រព័ន្ធ៖ សូមរៀបចំនៅក្នុងកៅអីដែលស្អាតខ្លាំង ហើយប្រើគន្លឹះ និងបំពង់ប្រតិកម្មដោយគ្មានសំណល់នុយក្លេអ៊ែរ។វាត្រូវបានផ្ដល់អនុសាសន៍ឱ្យប្រើគន្លឹះជាមួយ cartridges តម្រង។ជៀសវាងការចម្លងរោគឆ្លង និងការចម្លងរោគ aerosol ។

2.កម្មវិធីប្រតិកម្ម

កម្មវិធីស្តង់ដារ

កម្មវិធីរហ័ស

[ចំណាំ]៖ កម្មវិធីលឿនគឺសមរម្យសម្រាប់ហ្សែនភាគច្រើន ហើយកម្មវិធីស្តង់ដារអាចត្រូវបានសាកល្បងសម្រាប់ហ្សែនរចនាសម្ព័ន្ធបន្ទាប់បន្សំស្មុគស្មាញនីមួយៗ។

ក) សីតុណ្ហភាព និងពេលវេលានៃការបន្ទោរបង់៖ សូមកែតម្រូវទៅតាមប្រវែងនៃ primer និងហ្សែនគោលដៅ។

ខ) ការទទួលបានសញ្ញាហ្វ្លុយអូរីស (★)៖ សូមកំណត់នីតិវិធីពិសោធន៍ដោយយោងតាមតម្រូវការក្នុងការណែនាំសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ឧបករណ៍។

គ) ខ្សែកោងរលាយ៖ កម្មវិធីលំនាំដើមឧបករណ៍អាចត្រូវបានប្រើជាធម្មតា។

3. ការវិភាគលទ្ធផល 

អប្បបរមានៃការចម្លងជីវសាស្រ្តចំនួនបីត្រូវបានទាមទារសម្រាប់ការពិសោធន៍បរិមាណ។បន្ទាប់ពីប្រតិកម្ម ខ្សែកោងពង្រីក និងខ្សែកោងរលាយត្រូវបញ្ជាក់។

3.1 ខ្សែកោងពង្រីក៖

ខ្សែកោងពង្រីកស្តង់ដារគឺរាងអក្សរ S ។ការវិភាគបរិមាណគឺត្រឹមត្រូវបំផុតនៅពេលដែលតម្លៃ Ct ធ្លាក់ចន្លោះពី 20 ទៅ 30។ ប្រសិនបើតម្លៃ Ct តិចជាង 10 នោះ វាចាំបាច់ក្នុងការពនរគំរូ ហើយអនុវត្តការធ្វើតេស្តម្តងទៀត។នៅពេលដែលតម្លៃ Ct ស្ថិតនៅចន្លោះពី 30-35 វាចាំបាច់ក្នុងការបង្កើនកំហាប់គំរូឬបរិមាណនៃប្រព័ន្ធប្រតិកម្មដើម្បីធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវប្រសិទ្ធភាព amplification និងធានានូវភាពត្រឹមត្រូវនៃការវិភាគលទ្ធផល។នៅពេលតម្លៃ Ct ធំជាង 35 លទ្ធផលតេស្តមិនអាចវិភាគបរិមាណនៃការបញ្ចេញហ្សែនបានទេ ប៉ុន្តែអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគគុណភាព។

3.2 ខ្សែកោងរលាយ:

កំពូលតែមួយនៃខ្សែកោងរលាយបង្ហាញថាភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្មគឺល្អហើយការវិភាគបរិមាណអាចត្រូវបានអនុវត្ត។ប្រសិនបើខ្សែកោងរលាយបង្ហាញពីកំពូលទ្វេ ឬច្រើន ការវិភាគបរិមាណមិនអាចអនុវត្តបានទេ។ខ្សែកោងរលាយបង្ហាញពីកំពូលទ្វេ ហើយវាចាំបាច់ក្នុងការវិនិច្ឆ័យថាតើកំពូលភ្នំដែលមិនមែនជាគោលដៅគឺ primer dimer ឬការពង្រីកមិនជាក់លាក់ដោយ DNA agarose gel electrophoresis ។ប្រសិនបើវាជា primer dimer វាត្រូវបានផ្ដល់អនុសាសន៍ឱ្យកាត់បន្ថយការប្រមូលផ្តុំ primer ឬរៀបចំឡើងវិញនូវ primers ជាមួយនឹងប្រសិទ្ធភាព amplification ខ្ពស់។ប្រសិនបើវាជាការពង្រីកមិនជាក់លាក់ សូមបង្កើនសីតុណ្ហភាព annealing ឬរៀបចំឡើងវិញនូវ primers ដោយជាក់លាក់។

កំណត់ចំណាំ

សូមពាក់ PPE ដែលចាំបាច់ អាវក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ និងស្រោមដៃ ដើម្បីធានាសុខភាព និងសុវត្ថិភាពរបស់អ្នក!

ផលិតផលនេះប្រើសម្រាប់ស្រាវជ្រាវតែប៉ុណ្ណោះ!